QARA KƏNDALAŞ EKSTRAKLARININ ŞƏKƏRLİ DİABETİN EKSPERIMENTAL MODELİ FONUNDA QANDA QLÜKOZANIN MİQDARINA TƏSİRİ

26-12-2016

Ключевые слова: бузина черная, сахарный диабет, глюкоза в крови, аллоксановая модель.

Введение. Несмотря на то, что в современной фармакотерапии применяется широкий ассортимент препаратов разнонаправленного действия, потребность в лекарственных растениях растет из года в год. Лекарственные растения используются как самостоятельное средство лечения, так и входят в комплексное лечение многих заболеваний, как в народной, так и в традиционной медицине [9]. Их преимущество перед синтетическими препаратами объясняется низкой токсичностью, мягким и одновременно мультикомпо-нентным действием, охватывающий широкий спектр фармакологических эффектов [2-4]. Известно, что некоторые лекарственные растения содержат комплекс биологически активных веществ, которые оказывают положительный эффект на углеводный и другие виды обмена [11], на функции жизненно важных органов и систем, таких как сердечно-сосудистая, центральная нервная, пищеварительная, мочевыводящая, крови и др. [6]. Но широкое использование их ограничено ввиду малой изученности.

Одним из перспективных видов, требующих всестороннего исследования являются широко распространенные в Азербайджане растения рода бузина (Sambucus) семейства Адоксовые (Adoxaceae) [10]. Наиболее изученным видом этого рода является бузина черная. В качестве сырья используются цветки и плоды бузины, реже – кора, молодые ветви и листья, которые также входят в состав многих сборов для лечения патологий гепатобиллиарной системы.

Учитывая богатый состав биологически активных веществ бузины черной, в том числе флавоноидами и другими веществами с антиоксидантной и антирадикальной активностью, а также неоспоримую роль участия свободных радикалов в патогенезе многих заболеваний и последние данные науки о том, что применение антиоксидантов (АО)  является патогенетически обоснованным методом их лечения, в том числе и сахарном диабете (СД)  [5,8], мы решили выявить фармакологическое действие бузины черной при некоторых патологиях. А так как различные части растения широко применяются в составе противодиабетических сборов, то сочли целесообразным в первую очередь на фоне экспериментального СД выявить наличие гипогликемического эффекта у  экстрактов, полученных из цветков, листьев и плодов растения.

Материалы и методы исследований.  Эксперименты были поставлены на 53 белых беспородных крысах, у которых  методом Р.Э. Джафаровой создавали экспериментальную модель аллоксанового СД.  (Джафарова Р.Э., 2013) [1].. Животные были разделены на 6 групп: 1-ая группа – животные, находящиеся в интактном состоянии (5 крыс); 2-ая группа – группа модель (5 крыс) – животные, с экспериментальным СД, моделированный аллоксаном с содержанием глюкозы в крови на 7-е сутки после начала моделирования не менее 500 мг/дл.  Животные на 7-е сутки декапитировались, кровь забиралась для лабораторных исследований. Результаты биохимического анализа крови этих животных служила доказа-тельством того, что получена адекватная модель СД.

3-я – контрольная группа (10 крыс), получала в качестве плацебо физиологический раствор хлорида натрия. Эти животные  были разделены на две подгруппы по 5 крыс в каждой: 1-я подгруппа декапитировалась на 3-и сутки, а 2-я подгруппа – на 7-сутки с начала введения плацебо.

4-я группа - получала внутрибрюшинно 1мл/100 г экстракта цветков бузины черной 3 раза в день в течение 7 дней. Животные этой группы были также разделены на 2 подгруппы: 1-я подгруппа (5 крыс) декапитировалась на 3-и сутки, 2-я подгруппа (7 крыс) обезглавливалась на 7-е сутки.

5-я группа - животные, получавшие внутрибрюшинно 1мл/100 г экстракта листьев бузины черной  3 раза в день в течение 7 дней. 1-я подгруппа этой группы (5 крыс) декапити-ровалась на 3-и сутки, 2-я подгруппа (5 крыс) умертвлялась  на 7-е сутки.

6-я группа - животные, получавшие внутрь 1,5 мл/100 г экстракт плодов бузины черной 3 раза в день в течение 7 дней: 1-я подгруппа (5 крыс) декапитировалась на 3-и сутки, 2-я подгруппа (6 крыс) обезглавливалась на 7-е сутки.

Содержание сахара в крови определяли при помощи индикаторной бумаги IME-DC тест – анализатором и ферментативным колориметрическим методом без депротеинизатора (GOD-PAP), реактив Глюкоза – Human, анализатор ФП-901, при длине волны 500 нм.

Статистическую обработку полученных результатов проводили параметрическим методом с использованием t-критерия Стьюдента и непараметрическим определением значений  U для критерия Вилкоксона-Манна-Уитни [7].

Результаты и их обсуждение.Результаты определения содержания глюкозы в крови животных представлены в таблице 1.

Как видно из таблицы содержание глюкозы в крови животных 1-ой группы составляло 65,4±3,7 мг/дл; во 2-ой группе (группа модель) –  539,0±10,6 мг/дл; в 1-ой подгруппе 3-ей группы (контрольная группа) – 537,4±6,3 мг/дл, а во 2-ой подгруппе – 551,8±7,7 мг/дл; в 1-ой подгруппе 4-ой группы ( получавшей экстракт цветков бузины черной) – 473,2±10,2 мг/дл, а во 2-ой подгруппе – 401,1±3,9 мг/дл; в 1-ой подгруппе 5-ой группы (получавшей экстракт листьев бузины черной) – 509,8±8,3 мг/дл, а во 2-ой подгруппе – 497,0±6,1 мг/дл; в 1-ой подгруппе 6-ой группы (получавшей экстракт плодов бузины черной) – 558,8±3,2 мг/дл, а во 2-ой подгруппе – 537,0±9,7 мг/дл.

Как видно из полученных результатов в крови животных, у которых при помощи аллоксана создавали экспериментальную модель СД, содержание глюкозы резко возрастало, увеличившись по сравнению с интактными значениями на 724, 2% (р˂0,001) (2-я группа – группа модель). Это связано с тем, что аллоксан, обладающий избирательной повреждающей тропностью к β-клеткам поджелудочной железы приводит к их тотальной гибели, в результате чего развивается абсолютный дефицит инсулина, что и является причиной столь высокого содержания глюкозы в крови экспериментальных животных. Результаты биохимического анализа крови этих животных служила доказательством того, что получена адекватная модель СД. Поэтому, это значение содержания глюкозы и других исследуемых показателей крови животных, у которых введением аллоксана по методике Р.Э.Джафаровой (2012) была создана экспериментальная модель СД, обозначено нами как исходное значение.

В остальных группах содержание глюкозы в крови животных было ниже. Динамика изменения процесса представлена на рис. 1.

Таблица  №1

Содержание глюкозы в крови животных

Статистическая достоверность по критерию t- Стьюдента:

*- р ˂ 0,001 по сравнению с интактным значение  

Рис. 1. Динамика снижения глюкозы в крови животных под действием экстрактов  цветков, листьев и плодов бузины черной на фоне аллоксанового диабета

Как видно из рисунка, исходное значение глюкозы в крови в группах, принимавших исследуемые экстракты, изменилось. Так, применение экстракта цветков бузины черной приводило по сравнению с исходным значением к снижению концентрации глюкозы, которое на 3-и сутки составляло 12,2% (р˂0,01), на 7-е сутки 25,6% (р˂0,001). В группе, получавшей экстракт  листьев бузины черной содержание глюкозы в крови снизилось на 3-и сутки на 5,4% (р˃0,05), а на 7-е сутки – на 7,8% (р˂0,01), по сравнению с исходным значением. Животные, получавшие экстракт плодов бузины черной показали другую картину, у них в крови содержание глюкозы несколько повысилось на 3-и сутки и составляло 3,05% (р˃0,05), а на 7сутки – снизилось  на 2,68% (р˃0,05).

Известно, что в результате естественной реверсии диабетического статуса у экспериментальных животных могут происходить определенные изменения содержания глюкозы в крови. Наши определения показали, что на 3-и сутки содержание глюкозы в крови животных этой группы были ниже, чем в группе модель на 0,3% (р˃0,05), а на 7сутки – выше на 2,4% (р˃0,05).  Несмотря на недостоверность изменений, учитывая значительное % выражение, эта группа  являлась контрольной группой и все результаты биохимических данных  4-6 группы (основные группы) сравнивались с результатом этой группы. По сравнению с контрольной группой содержание глюкозы в крови животных в 1-ой подгруппе 4-ой группы (получавшей экстракт цветков бузины черной) снизилось на 11,9% (р˂0,001), а во 2-ой подгруппе – на 27,3% (р˂0,001); в 1-ой подгруппе 5-ой группы (получавшей экстракт листьев бузины черной) снизилось на 5,1% (р˂0,05), а во 2-ой подгруппе – на 9,9% (р˂0,001); в 1-ой подгруппе 6-ой группы (получавшей экстракт плодов бузины черной) повысилось на 1,05% (р˃0,05), а во 2-ой подгруппе – снизилось на 0,48% (р˃0,05). Как видим, полученные изменения данных обладают статистической большей достоверностью, так разброс значений в группе контроль не так велик, как в группе модель.

По сравнению с 3-им днем содержание глюкозы в крови на 7-ой день в 4 группе уменьшилось на 15,2% (р˂0,001), в 5 группе уменьшилось на 2,5% (р˃0,05),  в 6-ой  группе уменьшилось на 3,1% (р˂0,05).

Полученные показатели во всех случаях значительно превосходят показатель интактного  состояния (р˂0,001).

Таким образом, анализ полученных данных показывает, что на фоне экспери-ментального СД экстракты цветков и листьев бузины черной в небольшой степени, но статистически достоверно снижают содержание глюкозы в крови животных, а экстракт плодов растения на этот показатель выраженного действия не оказывает.

 

ƏDƏBİYYAT - ЛИТЕРАТУРА– REFERENCES:

 

1.Джафарова, Р.Э. Сравнительное исследование различных моделей аллоксаниндуцированного сахарного диабета // Казанский Медицинский Журнал, Казань, 2013, Т.94, № 6, с. 915-919.
2.Залетова Т.С. Возможности фитотерапии для детоксикации организма // Вопросы диетологии. 2014. Т. 4. № 4. с. 32-34.
3.Корсун Е.В.  «Детская линия» -коллекция чайных напитков для малышей на основе растительного сырья (фитотерапия в работе педиатров) //Практика педиатра. 2011. № 1. с. 37-39.
4.Куркина A.В.  Флавоноиды фармакопейных растений . Самарский государственный медицинский университет ",  Самара, 2012. 125 с.
5.Недосугова, Л. В. Окислительный стресс при сахарном диабете 2-го типа и возможности его медикаментозной коррекции: Авторреф. дис. … докт.мед.наук. М., 2006, 44c.
6.Сафонов Н.Н. Полный атлас лекарственных растений – М.:ЭКСМО, 2007, 310 c.
7.Статистические методы исследования в медицине и здравоохранении / Под редакцией Л.Е.Полякова. Ленингрнд: Медицина, 1971, 199с.
8.Bayens J.W., Thorpe S.R. Oxidative stress in diabetes: Antioxidants in Diabetes Management. Ed. Packer // New York: M. Dekker Inc., 2000 р. 58-66
9.Lim S, Yoon JW, Choi SH. Effect of ginsam, a vinegar extract from Panax ginseng, on body weight and glucose homeostasis in an obese insulin-resistant rat model // Metabolism, 2009, №58, р. 8-15
10.Mikulic-Petkovsek M., Ivancic A., Schmitzer V. et al. Comparison of major taste compounds and antioxidative properties of fruits and flowers of different Sambucus species and interspecific hybrids //  Food Chemistry, Volume 200, 1 June 2016, Pages 134-140
11.Neelesh M., Sanjay J., Sapna M. Anti-diabetic potential of medicinal plants // Acta Poloniae Pharmaceutica с Drug Research, 2010, v. 67, № 2, p. 113-118