SÜDƏMƏR YAŞ DÖVRÜNDƏ ALLERGİK BRONXİTLİ UŞAQLARDA İL-4, İL-10 SİTOKİN GENLƏRİNUİN POLİMORFİZMİNİN ÖYRƏNİLMƏSİ

07-04-2017

С каждым годом продолжает увеличиваться число больных с аллергичес кой патологией, в том числе аллергическим бронхитом (АБ). Заболеваемость аллергическим бронхитом связана, в первую очередь, с воздействием факторов окру жающей среды и генетической предрасположенностью организма (1, 2, 3).

АБ относится к многофакторным заболеваниям, в развитие которых принимает участие множес тво генов. Неблагоприятный генетический фон реализуется при взаимодейст вии с факторами среды и проявляется в формировании патологического фено типа (1,3).

Современные успехи молекулярной генетики привели к возможности реального выделения и изучения генетических маркеров у больных АБ. В настоящее время известно более 600 генетических маркеров, обуславливающих развитие аллергических заболеваний. Накоплены результаты множества исследований, свидетельствующие об ассоциации аллельных вариантов генов интерлейкинов (IL-4, IL-10, TNF-α), рецепторов (IgEreceptor (MS4A2), IL-4 receptor (IL 4R) (4,2,5).

Цитокины определяют сложные межклеточные кооперативные взаимо отношения иммунокомпетентных клеток и при этом, имеют свой генетический маркер (6,7). В свою очередь, интерлейкины определяют различный тип Th1- bTh2- иммунного реагирования и формирование различных вариантов АБ (8). Цитокины играют существенную роль в контроле всех стадий развития и поддержания аллергических реакций и воспаления, поэтому анализ регуляции их активности имеет очень большое значение для понимания молекулярных основ патогенеза бронхолегочных заболеваний (2,3,9). Разнообразие генетических факторов определяет клинический полимор физм и гетерогенность патологии (9).

Полиморфизм по изучаемым генотипам может значительно отличаться в за висимости от этнической принадлежности и регионального фактора и определ яет содержание цитокинов и общего IgE в сыворотке крови пациентов (10).

По этому изучение генетического полиморфизма ведущих цитокинов IL-4, IL-10, TNF-α у больных аллергическим бронхитом является актуальной совре менной проблемой. 

Материалы и методыАнализировался полиморфизм генов интерлейкинов IL-4 ( C– 589T), IL-10  (G– 1082A) и TNF-α (G– 308A) с помощью тест систем ГОСНИИ генетики (г.Москва) методом полимеразной цепной реакции в режиме «real-time». Матер иалом для исследования были образцы периферической крови.

Генотипы АБ по изучаемым маркерам интерлей кинов соответствовали нормальной гомозиготе, гетерозиготе и мутантной гомо зиготе.

Иммуногенетическое исследование проведено 111 детям грудного возрас та. Всего под наблюдением находился 271 ребенок с диагнозом «аллергический бронхит».

Для статистической обработки данных использовали прикладную прог рамму «Статистика-6». Применяли непараметрические методы статисти ки. При сравнении двух выборочных средних в пределах одной выборки использовали критерий Вилькоксона, при сравнении групп между собой – критерий Манна Уитни.

Результаты и обсуждениеУ детей грудного возраста с аллергическим бронхитом выявлена различ ная встречаемость генетического полиморфизма цитокинов. Наиболее частовст речался гетерозиготный генотип: CT IL-4 (C – 589T) у 54,05%, GА IL-10 (G – 1082A) у 70,27% пациентов (таблица 1). Реже наблюдался нормозиготный гено тип по всем изучаемым видам цитокинов: в 1,35 раз IL-4, в 2,5 раза IL-10. При изучении генотипа TNF-α наблюдали другую тенденцию: нормозигота GG (G– 308A) встречалась в 5 раз чаще, чем гетерозигота GA (G– 308A) (таблица 1). Доля выявления мутантной гомозиготы для IL-4, IL-10 и TNFα была достоверна по всем видам цитокинов, хотя и встречалась реже по сравнению с другими ге нотипами. Мутантная гомозигота выделена по IL-4 TT (C – 589T) всего у 6 (5,41%), по IL-10AA (G– 1082A) у 3 (2,70%) и по TNFα AA (G– 308A) у 3 (2,70%) больных детей. Данные были достоверно значимые при сравнении час тоты встречаемости гетерозигот с мутантной зиготой и мутантной зиготой с нормозиготой по всем группам генов цитокинов, соответственно (p<0,05) (таблица 1).

Частота встречаемости генотипов цитокинов IL-4, IL-10, TNFα при АБ у детей грудного возраста.

Известно, что IL-4 является основным цитокином Th2 иммунного реа гирования, определяя продукцию IgE-антител к этиотропным аллергенам. Та ким образом, именно аллель гена CTIL-4 (C– 589T), возможно, является веду щей в развитии АБ.

Сочетание гетерозиготного и монозиготного генотипирования является прогностически неблагоприятным и определяет более тяжелое течение основ ного и сопутствующих заболеваний, а нормозиготное, наоборот, - более бла гополучное, контролируемое.

У 111 детей с аллергическим бронхитом изучен полиморфизм генов интер лейкинов IL-4 (С–589 Т),IL-10 (G– 1082A)и TNF-L (G–308A) тест системами Гос. НИИ генетики (г.Москва) методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме «real-time».

Таблица  №1

Частота встречаемости генотипов цитокинов IL-4, IL-10, TNFα при аллергическом бронхите у детей грудного возраста

Зиготы	IL-4 (С-589Т)			IL-10 (G-1082A)		TNFα (G-308A)
	абс.	%		абс.	%	абс.	%
Нормальная гомозигота	45		40,54	30	27,03	90	81,08
Гетерозигота	60		54,05*	78	70,27	18	16,22
Мутантная гомозигота	6		5,41**	3	2,70**	3**	2,70
Всего	111		100	111	100	111	100

* - p<0,05 достоверность частоты встречаемости гетерозиготы и мутантной гомозиготы;  ** - p<0,05 – достоверность частоты встречаемости нормозиготы и мутантной гомозигот

        Наиболее часто встречается генотип: CTIL-4 (C-589T) у 54,05%, GAIL-10 (G – 1082A) у 70,27%. Мутантная гомозигота выделена по IL-4 TT (C – 589T) всего у 6 (5,41%) по IL-10AA (G – 1082A) у 3 (2,70%) и поTNFa AA (G – 308A) у 3 (2,70%) больных. Полиморфизм генов определяет особенности патогенеза АБ. Генотипы гетерозиготы и мутантной гомозиготы по всем видам генов цитокинов являются предиктором тяжелого течения АБ.

Выводы.

1.Генетические факторы играют важную роль в развитии аллергического бронхита.

2.Анализ полиморфизма генов цитокинов у больных детей показал, что наиболее часто встречается генотип: CTIL-4 (C– 589T) у 54,05%,GAIL-10 (G– 1082A) у 70,27%  пациентов.

 

ƏDƏBİYYAT - ЛИТЕРАТУРА– REFERENCES:

 

1.Будчанов Ю.И. Генетика бронхиальной астмы // Практическая медици на. 2010, т. 45, № 6, с. 19-21.
2.Гречанина Е.Я., Безродная А.И., Ходош Э.М. Иммуногенетические характеристики бронхиальной астмы/ /АСТМАНААЛЕРГIЯ, 2011,№ 3, с.23-26.
3.Локшина Э.Э., Зайцева О.В. Роль генетических маркеров в ранней диаг ностике атопических заболеваний // Педиатрия, 2006, №3, с.87-91.
4.Брагина Е.Ю., Фрейдин М.Б., Тен И.А., Огородова Л.М. Полиморфизм генов биотрансформации ксенобиотиков GSTT1, GSTM1, CYP2E1 и CYP2 C19  у больных атопической бронхиальной астмой // Бюллетень СО РАМН, 2005, т.117, № 3, с.121-125.
5.Миронова Ж.А. Молекулярные механизмы стероидорезистентности при бронхиальной астме: роль интерлейкинов 4 и 13 // Казанский медицинский жур нал, 2011, т.92, № 6, с. 880-882.
6.Ризванова Ф.Ф., Пикуза О.И., Файзуллина Р.А., и др.,Генетическая диагностика: полиморфизм генов цитокинов // Практическая медицина, 2010, т.45, № 6 , с.41-43.
7.Szalai C., UngvarriI., PelyheL., Tolgyesiand A Falus Asthma from aphar maco genomic pointofview// British Journal of Pharmacology. 2008, vol.153, p.1602-1614.
8.Damsker J.M., Hansen A.M., Caspi R.R. Th1 and Th17 cells //Ann NY Acad. Sci., 2010, vol.  83,№ 11 , p. 211-221.
9.Андрейчикова Е.А., Пискунов А.А., Сенников С.В., Козлов В.А. Срав нительные аспекты аллельного полиморфизма гена ИЛ-4 у коренных и приш лых жителей Хакасии, больных бронхиальной астмой // Бюллетень СОРАМН. 2011, т.31, № 6, с. 69-73.
10.Kabesch M., TzotchevaI., Carr D., et al., A complete screening of the IL4 gene: novel polymorphisms and their association with asthma and IgE in childhood // J Allergy Clin Immunol. 2003, 112, №  5 , p. 893-898.

Annunziato F., Romagnani S. The transient nature of the Th17 phenotype //Eur. J. Immunol., 2010, vol.  40 №12, p.3312-3316