SAĞLAMLIQ

ПОКАЗАТЕЛИ ЛИПИДНОГО СПЕКТРА И УГЛЕВОДНОГО ОБМЕНА У ПАЦИЕНТОВ С ИБС ПРИ РАЗЛИЧНЫХ ГЕНОТИПАХ ГЕНОВ АРОЕ И PAI-1

04-10-2017

Ключевые слова: Генотип, ген PAI-1, ген АроЕ, липидный обмен, тощаковая глюкоза,  ИБС, фатальный исход (ФИ).

В настоящее время доказано, что основными факторами сердечно-сосудистого риска являются модифицируемые факторы, такие как курение, ожирение, АГ, дислипидемия, а также немодифицируемые факторы риска -пол и возраст (4, 7). Показано, что сочетание этих факторов способствует развитию дисфункции эндотелия (5), активации процесса атерогенеза с формированием атеросклеро-тической бляшки и последующим тромбозом (6). Следует отметить, что ИБС относится к многофакторным заболеваниям, в формировании которых принимают участие средовые и генетические факторы (2, 3).

Полиморфные генетические системы служат «фоном», который повышает вероятность для определённых лиц оказаться поражёнными атеросклерозом коронарных сосудов.

Цельюнастоящей работы явилось исследование параметров липидного и углеводного обмена у пациентов с ИБС с сочетанием генотипов гена АроЕ и PAI-1

Материалы и методы исследования  Под наблюдением находилось 80 пациентов с ИБС (51 мужчин и 29 женщин) в возрасте от  39 до 65 лет, проживающих в г. Баку.

Работа выполнена на базе НИИ кардиологии Азербайджана. Диагноз ИБС ставили на основе данных анамнеза в сочетании с результатами инструментальных исследований: ЭКГ покоя в 12 отведениях, тредмил-теста, эхо-кардиографии и теста 6 минутной ходьбы. Липидный спектр крови (уровень ОХС, ХС-ЛПНП, ХС-ЛПВП и ТГ) определяли на роботизированном иммуноферментном анализаторе BS 200 (Китай-США) с использованием фирмы “Human” (Германия).

Уровень глюкозы в капиллярной крови пациентов определяли натощак глюкозооксидазным ферментным методом.

При уровне глюкозы в капиллярной крови натощак более 5,6 ммоль/л с целью диагностики НТГ проводился ПГТТ, оценивался уровень гликемии через 2 часа после приема 75 гр. глюкозы, растворенной в 200 мл теплой кипяченой воды и выпитой в течение не более 5 минут (1).

Геномную дезоксирибонуклеиновую кислоту (ДНК) выделяли из лейкоцитов венозной крови с («Promega», США). ПЦР проводили на аппарате “CFX 96” (“Biorad”, США) на реактивах «Promega» (США), в 25 мкл смеси, содержащей: 5 мкл буфера (кат. номер M890A); 2,5 мкл смеси нуклеозидтрифосфатов (кат. Номер U151В); 2 мкл MgCl2 (кат. номер А351Н); 0,3 мкл Taq-ДНК-полимеразы (кат. номер М829В).

Продукты ПЦР и ферментативного гидролиза подвергали электрофоретичес-кому разделению в 6%-м полиакриламидном геле (ПААГ) в трисборатном буфере (трис 89 мM, борная кислота 89 мM, ЭДТА 2 мM). Фрагменты ДНК в составе ПААГ окрашивали в водном растворе этидия бромида (0,5 мкг/мл) и визуализировали в ультрафиолетовом свете с помощью аппаратов «ТСМ-220М» и «DocPrint» («Vilber Lourmat», Франция).

Результаты исследования    Анализ связи полиморфизма кодирующей части гена APOE с уровнями липидов крови – ОХС, ХС‐ЛПВП, ХС ЛПНП и ТГ у жителей г. Баку показал следующие результаты:  различия в средних уровнях ОХС были статистически значимы (p<0,05) при попарных сравнениях между генотипом е4/е4 и генотипами е2/е3, е3/е3, е3/е4 (Таблица 1). У пациентов мужского пола максимальное значение среднего уровня общего холестерина (ОХС) установлены для генотипа е4/е4 – 6,35 (1,1) ммоль/л., который статистически значимо выше уровня ОХС у пациентов идентичного пола с генотипами е3/е4 – 5,25 (0,72) ммоль/л,  (р < 0,05); е3/е3 – 5,4 (0,65) моль/л., р < 0,05 и генотипом е2/е3 -  5,07  (0,85), р < 0,05.

Минимальные значения ОХС отмечены для лиц с генотипом е2/е3 – 5,07 (0,85) моль/л. Но достоверно данное значение только относительно лиц с генотипом е4/е4, для остальных генотипов выявленная разница статистически не значима. Изучение данного генотипа у лиц женского пола не выявило достоверную разницу между исследуемыми генотипами.

Максимальные значения ХСЛВП у лиц мужского пола также выявлены для генотипа е4/е4 – 1,78 (0,58) ммоль/л, что выше чем у лиц с генотипом е3/е4 – 1,25 (0,39) ммоль/л, р < 0,05, (таблица 1), что можно объяснить повышением ОХС у этой группы лиц. Минимальные значения средних уровней ХС-ЛПВП определены для генотипа е2/е4 -1,22 (0,6) ммоль/л и е3/е4 - 1,25 (0,39), ммоль/л. Для женского пола не установлено статистически значимой разницы в уровне ХС-ЛПВП между различными генотипами гена АроЕ.

Для среднего уровня ХС-ЛПНП при сравнении исследуемых генотипов статистически значимые различия установлены для е2/е4 у лиц мужского пола и е2/е4 и е2/е3 для лиц женского пола. У лиц мужского пола наивысшие показатели среднего уровня ХС-ЛПНП установлены при генотипе е4/е4 – 4,1(0,74) ммоль/л, что на 0,7 ммоль/л больше, чем при генотипе е3/е4, на 0,57 ммоль/л выше, чем при генотипе е3/е3, на 1,1 ммоль/л – относительно е2/е3 и на 0,74 ммоль/л выше, чем у лиц с генотипом е2/е4,(р <0,05, соответственно).

Максимальные значения среднего уровня ХС-ЛПНП для женщин также установлены при генотипе е4/е4 - 3,8 (0,64) ммоль/л, что достоверно выше, чем при генотипах е3/е4 и е2/е3, р < 0,05-0,01. Минимальное значение ХС-ЛПНП выявлено для генотипа е2/е3 – 2,7 (0,56) ммоль/л. Наличие данного генотипа в женской группе вызывает снижение среднего уровня ХС-ЛПНП на 0,6 ммоль/л по сравнению с генотипом е3/е3 – 3,3 (0,47) ммоль/л, (р < 0,05) и на 1,1 ммоль/л относительно генотипа е4/е4, р < 0,01, (таблица 1).

Изучение концентрации ТГ при различных генотипах гена АроЕ у пациентов при ИБС показало: для мужской группы установлены  высокие значения среднего уровня ТГ при генотипе е2/е4 - 3,64 (0,77) ммоль/л и  е2/е3 - 3,59 (0,73) ммоль/л. Средний уровень ТГ у лиц с генотипом е2/е3 достоверно превышал значения данного показателя относительно генотипа е3/е3 - 3,0 (0,6) ммоль/л, р < 0,05. В силу малочисленности пациентов с генотипом е2/е4 достоверность разницы для данного генотипа выявить не удалось. Возможно, при повышении численности обследованных разница между генотипом е2/е4 и другими генотипами окажется статистически значимой. У лиц женского пола среднее значение ТГ были высоким при генотипе е2/е3 - 3,05 (0,42) ммоль/л., которое превышает значения данного показателя у женщин с генотипом е3/е3 - 2,36 (0,61) ммоль/л., р < 0,05,  е3/е4 – 2,45 (0,5) ммоль/л., р < 0,05,   и е4/е4 – 2,48 (0,42) ммоль/л., р < 0,05.

Изучение липидного обмена при различных генотипах гена PAI-1 показало, (таблица 2), статистически значимое понижение уровня триглицеридов у пациентов с генотипом 4G/4G (3,0 (0,7) ммоль/л) по сравнению с лицами c генотипом 5G/5G (3,7 (0,64) ммоль/л), р <0,05. Не отмечено достоверной разницы в уровне ОХС, ХС-ЛПВП и ХС-ЛПНП между исследуемыми генотипами.

Таблица  №1

Генотипы гена Аpoe и уровень липидов у пациентов с ИБС г. среди азербайджанцев

Примечание: М– средняя арифметическая, SD‐ стандартное отклонение, n – число индивидов, р – уровень статистической значимости между генотипами.  

 

Таблица  №2

Особенности липидного спектра у пациентов с ИБС с различными генотипами гена PAI-1(SERPINE) среди азербайджанцев

*р – уровень статистической значимости относительно  генотипа 5G/5G

 

Проведено исследование липидного спектра плазмы и некоторых параметров углеводного обмена при сочетании генотипов е4/е4 и 4G/4G, (таблица 3).  У пациентов с ИБС при сочетании генотипов е4/е4 и 4G/4G отмечено достоверное повышение уровня ХСЛПНП, (4,36±0,55 ммоль/л) по сравнению с лицами с генотипом 4G/4G (3,3±0,48 ммоль/л), р < 0,05. Не установлено достоверных изменений для ХСЛВП и триглицеридов. Интересным представляется нарушение углеводного обмена у лиц при сочетании генотипов. Так у пациентов с ИБС с набором генотипов е4/е4 и 4G/4G наблюдается статистически значимое повышение уровня тощаковой глюкозы и НТГ - 6,9±1,4 ммоль/л  и 9,0±2,2 ммоль/л, по сравнению с аналогичными показателями для пациентов с генотипом 4G/4G сочетанным с другим генотипом гена АроЕ (не е4/е4 ), соответственно, 6,1±0,7 ммоль/л и 7,8±0,7 ммоль/л, р<0,05. Не отмечено достоверной разницы между исследуемыми генотипами в уровне РАI-1.

Таблица  №3

Особенности липидного спектра у пациентов с ИБС при сочетании генотипов гена PAI-1-4G/4G  с генотипам гена АроЕ- е4/е4 среди азербайджанцев

*р – уровень статистической значимости относительно генотипа 4G/4G

Итак, исследование липидного спектра у пациентов с ИБС при сочетании генотипов е4/е4 и 4G/4G с генотипами 4G/4G  гена РАI-1показало достоверно высокие цифры ХС-ЛПНП в сравнении с пациентами с генотипом 4G/4G.

Выводы

1.Генотип е4/е4 гена АроЕ является факторов риска для нарушения липидного спектра у пациентов с ИБС. У лиц с ИБС с генотипа е4/е4 установлено достоверное повышение ОХ и ХСЛПНП
2.Для пациентов с ИБС носителей генотипа 4G/4G гена PAI-1 установлено повышение уровня ТГ плазмы.
3.У пациентов с ИБС с сочетанием генотипов е4/е4 гена АроЕ и 4G/4G гена PAI-1 установлено значимое повышение уровня   ТГ, тощаковой глюкозы и НТГ, по сравнению с пациентами с генотипом 4G/4G гена PAI-1.

 

ƏDƏBİYYAT - ЛИТЕРАТУРА– REFERENCES:

 

1.Готвальд, Ф.Т. Хофланд В.С. Помоги себе сам: медитация М., 1992. - 78 с.
2.Клеменов, A.B. Внекардиальные проявления недифференцированной дисплазии соединительной ткани // Клиническая медицина. 2003. - №10. - С. 4-7.
3.Лившиц, A.M., Мебель Н.М. Диагностическая значимость электрокардиографических признаков рубцов миокарда при ишемической болезни сердца //Кардиология.- 1978. №6. - С. 100-107.
4.Chambless, L. A. Folsom, A. Sharrett et al. Coronary heart disease prediction in the Atherosclerosis Risk in Communities (AR1C) Study // J. Clin. Epidemiol. - 2003. - Vol. 56. - P. 880-990.
5.Del Turco, S., E.Bianchini, R.Bucalo Endothelial dysfunction. An integrated overview of the physiopatologic and diagnostic aspects //Recenti Prog. Med. -2012. - Vol.103, № 3. - P. 109-118.
6.Jackson, S.P. Arterial thrombosis-insidious, unpredictable and deadly // Nat. Med. - 2011. - Vol.17, №11.- P.1423-1436.
7.Morrison, A.C. L.A. Bare, L.E. Chambless et al. Prediction of Coronary Heart Disease Risk using a Genetic Risk Score: The Atherosclerosis Risk in Communities Study // Am J Epidemiol. - 2007. - Vol. 166, № 1.-P. 28-35.